Pribolab - IAC-011-3ZY-25PriboFast®黄曲霉素总量免疫亲和柱(中药专用柱）-21373

一、产品用途：

本产品可选择性吸附样品提取液中的黄曲霉毒素，从而实现对目标物的特异性纯化。过柱纯化后的样品液杂质显著减少 ，可用于不同分析方法的测定。

二、概述：

黄曲霉毒素是黄曲霉、寄生曲霉等真菌产生的次级代谢产物 ，被世界卫生组织癌症研究机构划分为 Ⅰ类致癌物 ，同时又是一种毒性极强的剧毒物质。广泛存在于各种谷物、中药及其副产品中。黄曲霉毒素作为肝癌的三大诱因之一 ，也是胃癌，肠癌等疾病的主要原因 ，对人类的健康构成很大威胁。中国对中药及中药饮片中的黄曲霉毒素有严格的限量标准。

三、反应原理：

本产品测定的基础是抗原抗体反应。黄曲霉毒素单克隆抗体固定于柱内凝胶上 ，样品中的黄曲霉毒素经过提取、过滤、稀释 ，然后缓慢通过黄曲霉毒素免疫亲和柱 ，在柱内黄曲霉毒素与抗体特异性结合 ，之后洗涤免疫亲和柱 ，除去未结合的其他物质。用甲醇洗脱黄曲霉毒素 ，注入到分析仪器中进行检测。

四、产品组成：

包括黄曲霉毒素总量免疫亲和柱、产品说明书及 COA。注 ：复杂样品需使用吐温 20-PBS 缓冲溶液（货号：PBS-004）。

五、产品参数：

1、交叉反应率

六、需要但未提供的材料：

设备：HPLC、泵流操作架、高速均质器、高速粉碎机、单道微量移液器；

器皿耗材：量筒、漏斗、收集瓶、容量瓶、玻璃纤维滤纸、离心管；

试剂：色谱级甲醇、蒸馏水、标准品、氯化钠。

七、试剂配制：

1、提取液：甲醇-水（7:3）

移取 700 mL 甲醇 ，加蒸馏水 300mL 混合。

2、吐温 20-磷酸盐缓冲溶液（以下简称吐温 20-PBS）：

配制方式 1 ：使用普瑞邦吐温 20-PBS 试剂包（货号： PBS-004）进行配制；

配制方式 2 ：称取 8.00 g 氯化钠 ， 1.20 g 磷酸氢二钠 ， 0.20 g 磷酸二氢钾 ，0.20 g 氯化钾 ，用 900 mL 蒸馏水溶解 ，然后用盐酸调节 pH 值至 7.4 ，加 5 mL 吐温 20 ，最后用蒸馏水稀释定容至 1000 mL。

八、样品处理：

毒素分析的最大误差来源是样品的收集和取样过程，所以要保证样品收集和取样的代表性。

1、称样 ：准确称取 15 g（精确至  0.01 g）试样 ，加入氯化钠  3g 置于均质杯中；

2、提取 ：加入 75 mL 甲醇水溶液（70%） ，均质提取 2min （搅拌速度大于 11000 r/min,普瑞邦均质器 Pribolab® 2000S转速  22000 r/min） ，4000 r/min 离心 5min ，取上清液于新离心管中。

3、稀释：取 15mL 滤液加入 35mL 吐温 20-PBS 缓冲溶液稀释。混匀后 4000 r/min  离心  10 min 或玻璃纤维滤纸过滤 ，待测（应调 pH 值至 6-8 之间）。

九、操作程序：

使用前将低温下保存的免疫亲和柱恢复至室温。

1、连接:  用 30 mL 注射器筒下端插穿免疫亲和柱上盖中间圆孔 ，使其连通；

2、上样:  移取上述 20 mL 上清液至注射器筒内，打开下端堵头；

3、富集:  将空气压力与注射器连接，调节压力使样品提取液以 1-3 mL/min 的流速缓慢通过免疫亲和柱，直至空气进入亲和柱 ，建议重力过柱；

4、洗涤:  依次用 10 mL 吐温 20-PBS 缓冲液和 10 mL 水加压清洗，弃去全部流出液，并使 2~3mL 空气通过柱体，将免疫亲和柱内液体排干；

5、洗脱:    在亲和柱中加入 1.5 mL 色谱级甲醇 ，通过重力过柱方式进行洗脱；然后轻微加压排净洗脱液 ，收集全部洗脱液，加水定容到 2 mL，混匀，用有机相微孔滤膜过滤，待上机检测。

十、注意事项

1、上柱液 pH 要在 6~8 之间，若偏离此范围需用盐酸或氢痒化钠调节 pH；

2、若样品浓度超出柱容量 ，需减少上柱量重新检测；

3、复杂基质必须使用吐温 20-PBS 缓冲液进行稀释后再进行过柱；

4、根据实际情况可以适当增减称样量 ，同时提取液体积需按比例进行调整；

5、使用前将低温下保存的免疫亲和柱恢复至室温；

6、免疫亲和柱需储存在 2-8℃条件下，不可冻存或常温保存；

7、黄曲霉毒素对人体有害 ，应做好安全防护措施；

8、使用过的玻璃容器及黄曲霉毒素溶液应以 10%次氯酸钠溶液浸泡过夜后再进行清洗。

十一、产品信息：

公司可提供的真菌毒素检测产品

：本公司提供毒素固体/液体标准品及质控样品