Pribolab - IAC-020-3-50PriboFast®玉米赤霉烯酮免疫亲和柱-3ml-54050

一、产品用途 ：

本产品可选择性吸附样品提取液中的呕吐毒素（脱氧雪腐镰刀菌烯醇） ，从而对样品液中的呕吐毒素（脱氧雪腐镰刀菌烯醇）起到非常针对性的纯化作用 ，过柱纯化后的样品液纯度被提高 ，可用于不同分析方法的测定。

二、概述 ：

脱氧雪腐镰刀菌烯醇（ Deoxynivalenol ，DON ）又称呕吐毒素（ vomitoxin ），主要是由镰刀菌的某些种产生的化学结构和生物活性相似的有毒代谢产物—单端孢霉烯族化合物中的一种。广泛存在于全球 ，主要污染小麦、大麦、玉米等谷类作物 ，也污染粮食制品 ，人和动物在误食被该毒素污染的粮谷类后可以产生广泛的毒性效应。呕吐毒素(脱氧雪腐镰刀菌烯醇)最明显的毒性作用是引起呕吐、腹泻、腹痛等症 ，并延缓生长、降低免疫机能 ，与贫血、免疫抑制、食管癌、克山病也具有密切联系 ，给人、家畜的健康造成巨大威胁。

三、反应原理 ：

本产品测定的基础是抗原抗体反应。呕吐毒素（脱氧雪腐镰刀菌烯醇）单克隆抗体固定于柱内凝胶上 ，样品中的呕吐毒素（脱氧雪腐镰刀菌烯醇）经过提取、过滤、稀释 ，然后缓慢通过呕吐毒素（脱氧雪腐镰刀菌烯醇 ）免疫亲和柱 ，在柱内呕吐毒素（脱氧雪腐镰刀菌烯醇）与抗体特异性结合 ，之后洗涤免疫亲和柱 ，除去未结合的其他物质。用甲醇洗脱呕吐毒素（脱氧雪腐镰刀菌烯醇） ，注入到分析仪器中进行检测。

四、产品组成 ：

包括呕吐毒素（脱氧雪腐镰刀菌烯醇）免疫亲和柱、产品说明书及 COA。

注 ：复杂样品需使用吐温 20-PBS 缓冲溶液（货号 ：PBS-004 ）。

五、产品参数 ：

1、性能参数

2、交叉反应率

六、需要但未提供的材料 ：

设备 ：HPLC、泵流操作架、高速均质器、高速粉碎机、单道微量移液器 ；

器皿耗材 ：量筒、漏斗、收集瓶、容量瓶、玻璃纤维滤纸、离心管 ；

试剂 ：色谱级甲醇、蒸馏水、标准品。

七、试剂配制 ：

1、提取液 ：蒸馏水

2、吐温 20-磷酸盐缓冲溶液（以下简称吐温 20-PBS） ：

配制方式 1 ：可使用普瑞邦吐温 20-PBS 试剂包（货号 ： PBS-004 ）进行配制 ；

配制方式 2 ：称取 8.00 g 氯化钠 ，1.20 g 磷酸氢二钠 ， 0.20g 磷酸二氢钾 ，0.20g 氯化钾 ，用 900 mL 蒸馏水溶解 ，然后用盐酸调节 pH 值至7.4 ，加 5 mL 吐温 20 ，最后用蒸馏水稀释定容至 1000 mL。

八、样品处理 ：

毒素分析的最大误差来源是样品的收集和取样过程 ，所以要保证样品收集和取样的代表性。

（一）花生 ，玉米 ，大米 ，小麦及其制品和饲料

1、称样 ：准确称取 25 g（精确至 0.1 g ）试样 ，加入  5g  聚乙二醇 ，加水 100 mL ，混匀 ；

2、提取 ：涡旋振荡器或摇床中超声或振荡 20min ，6000r/min下离心  10min或玻璃纤维滤纸过滤至澄清 ，待测（应调 pH值至 6-8 之间）。

（二）啤酒 ，黄酒等酒类

1、称样 ：取脱气酒类试样（含二氧化碳的酒类样品使用前先置于 4℃冰箱冷藏 30min ，过滤或超声脱气）或其他不含二氧化碳的酒类试样  20g（精确到  0.1g ），加入 1g 聚乙二醇 ，用水定容至 25.0mL ；

2、提取 ：涡旋振荡器或摇床中超声或振荡 20min ，6000r/min下离心  10min或玻璃纤维滤纸过滤至澄清 ，待测（应调 pH值至 6-8 之间）。

（三）酱油、醋、酱及酱制品

1、称样 ：准确称取 25 g（精确至 0.1 g ）试样 ，加入  5g  聚乙二醇 ，用水定容至 100mL ；

2、提取 ：涡旋振荡器或摇床中超声或振荡 20min ，6000r/min下离心  10min或玻璃纤维滤纸过滤至澄清 ，待测（应调 pH值至 6-8 之间）。

九、操作程序 ：

使用前将低温下保存的免疫亲和柱恢复至室温。

1、连接:  用 30mL 注射器筒下端插穿免疫亲和柱上盖中间圆孔 ，使其连通 ；

2、上样:  移取上述 2ml 上清液至注射器筒内 ，打开下端堵头 ；

3、富集:  将空气压力泵与注射器连接 ，调节压力使样品提取液以 1-3 mL/min 的流速缓慢通过免疫亲和柱 ，直至空气进入亲和柱 ，建议重力过柱 ；

4、洗涤:  依次用 5 mL   吐温-20 PBS 缓冲液和 5 mL 水加压清洗 ，弃去全部流出液 ，并使 2~3mL 空气通过柱体 ，将免疫亲和柱内液体排干 ；

5、洗脱:  在亲和柱中加入 2 .0 mL 色谱级甲醇 ，通过重力过柱方式进行洗脱 ；然后轻微加压排净洗脱液 ，收集全部洗脱液 ，涡旋混匀 ，以氮气吹至近干。加入 1mL  初始流动相充分溶解残渣 ，用有机相微孔滤膜过滤 ，待上机检测。

十、注意事项

1、上柱液 pH 要在 6~8 之间 ，若偏离此范围需用盐酸或氢氧化钠调节 pH ；

2、若样品浓度超出柱容量 ，需减少上柱量重新检测 ；

3、根据实际情况可以适当增减称样量 ，同时提取液体积需按比例进行调整 ；

4、使用前将低温下保存的免疫亲和柱恢复至室温 ；

5、免疫亲和柱需储存在 2-8℃条件下 ，不可冻存或常温保存 ；

6、呕吐毒素（脱氧雪腐镰刀菌烯醇）对人体有害 ，应做好安全防护措施 ；

7、使用过的玻璃容器及呕吐毒素（脱氧雪腐镰刀菌烯醇 ）溶液应以 10%次氯酸钠溶液浸泡过夜后再进行清洗。

十一、产品信息：

公司可提供的真菌毒素检测产品